Кровь на ИФА — что это? - коротко
Кровь на ИФА — это наличие гемоглобина в пробе, которое приводит к помутнению и искажению оптического сигнала, делая результаты недостоверными. Чтобы избежать этой проблемы, образцы обычно центрифугируют или применяют специальные реагенты для удаления эритроцитов.
Кровь на ИФА — что это? - развернуто
Кровь, взятая для иммуноферментного анализа (ИФА), представляет собой биологический материал, содержащий антитела, анти‑генные комплексы и другие белки, которые позволяют оценить наличие и уровень конкретных молекул в организме. При правильной подготовке образца и соблюдении всех этапов протокола ИФА дает количественную информацию о гормонах, инфекционных агентам, автоантителах и множестве других маркеров.
Для получения достоверных результатов необходимо выполнить несколько ключевых действий. Сначала кровь берут в специально подготовленные пробирки с антикоагулянтом (обычно ЭДТА или гепарином), что предотвращает свертывание и сохраняет целостность образца. Затем в лаборатории проводят центрифугирование, отделяя плазму или сыворотку от клеточных элементов. Именно плазма или сыворотка используется в тесте, поскольку они содержат свободные антитела и антигены.
Дальнейший процесс состоит из следующих шагов:
- Коатинг – покрытие микропланшетных лунок специфическими антителами, которые фиксируют целевой антиген из образца.
- Инкубация – добавление образца крови, позволяющее антигену связаться с фиксированным антителом.
- Промывка – удаление несвязанных компонентов, что повышает точность измерения.
- Добавление конъюгата – фермент, соединённый с вторичным антителом, который образует двойную связь с антигеном.
- Субстратная реакция – введение субстрата, преобразующего фермент в цветной продукт. Интенсивность цвета пропорциональна концентрации целевого вещества.
- Считывание – фотометрическое измерение оптической плотности, после чего полученные данные сравнивают с калибровочной кривой.
Результаты интерпретируют, сравнивая их с референсными значениями, установленными для конкретного маркера. Отклонения от нормы могут свидетельствовать о наличии инфекций, аутоиммунных процессов, гормональных дисбалансов или реактивных состояний. Важно учитывать, что некоторые факторы, такие как гемолиз, липемия или некорректное хранение образца, способны исказить показатель и привести к ложноположительным или ложноотрицательным результатам.
Преимущества использования крови в ИФА заключаются в высокой чувствительности, возможности одновременного анализа нескольких маркеров и относительной простоте автоматизации. Однако следует помнить, что точность анализа полностью зависит от качества образца, правильной калибровки оборудования и соблюдения всех протокольных рекомендаций. При соблюдении этих условий ИФА остаётся одним из самых надёжных методов лабораторной диагностики.