Что такое иммунотурбидиметрия? - коротко
Иммунотурбидиметрия — это метод количественного определения веществ в биологических жидкостях, основанный на измерении турбидности, возникающей при образовании иммунного комплекса. Он широко применяется в клинической лаборатории для контроля уровней гормонов, ферментов, лекарств и маркеров заболеваний.
Что такое иммунотурбидиметрия? - развернуто
Иммунотурбидиметрия — это аналитический метод, основанный на измерении оптической плотности суспензии, образующейся в результате реакции анти‑антитела с образованием нерастворимых иммунных комплексов. При взаимодействии специфических молекул (антигенов и антител) образуется частица, способная рассеирать свет; степень рассеяния пропорциональна концентрации исследуемого вещества в пробе.
Принцип работы метода заключается в следующем. В реакционную смесь вводятся образец, содержащий целевой антиген, и избыток соответствующего антитела, часто помеченного полимером или коллоидными частицами. При связывании образуются крупные агрегаты, которые делают раствор мутным. Специальный фотометрический детектор фиксирует интенсивность рассеянного света при определённой длине волны, а программное обеспечение преобразует полученный сигнал в концентрацию аналита, используя калибровочную кривую.
Ключевые элементы иммунотурбидиметрической системы включают:
- реакционный сосуд с постоянным перемешиванием, обеспечивающий равномерное распределение частиц;
- световой источник (обычно диодный лазер или светодиод) с узкой спектральной характеристикой;
- фотодетектор, фиксирующий рассеянный свет под углом 90° к лучу падающего излучения;
- система автоматического дозирования реагентов и проб, позволяющая проводить многократные измерения без ручного вмешательства.
Метод широко применяется в клинической лабораторной диагностике для определения концентраций гормонов (тестостерон, кортизол), инфекционных маркеров (антигенов вирусов, бактерий), биомаркеров онкологических заболеваний (AFP, PSA) и токсинов. Кроме того, иммунотурбидиметрия используется в пищевой и фармацевтической промышленности для контроля качества продукции, а также в экологическом мониторинге при выявлении следовых количеств загрязнителей.
Преимущества метода:
- высокая скорость анализа — результаты получаются за несколько минут;
- возможность автоматизации и параллельного измерения большого количества образцов;
- умеренная чувствительность, достаточная для большинства клинических приложений;
- отсутствие необходимости в сложных подготовительных этапах (например, в спектрофотометрии часто требуется разборка образца).
Ограничения, которые следует учитывать:
- зависимость точности от качества антител и их специфичности;
- ограниченный диапазон линейности, требующий разбавления высоких концентраций;
- потенциальные интерференции от липидов, гемолизов или других матричных веществ, способных образовывать неселективные частицы.
Типичный протокол измерения включает следующие шаги:
- Подготовка реакционной смеси: добавление фиксированного объёма антитела и буферного раствора.
- Введение образца в реакционную камеру.
- Инкубация при контролируемой температуре (обычно 37 °C) в течение 1–5 минут.
- Считывание оптического сигнала и сравнение с калибровочной кривой, построенной на стандартах известной концентрации.
В результате иммунотурбидиметрия обеспечивает надёжный, быстрый и относительно недорогой способ количественного определения биомолекул в различных биологических и технических матрицах, что делает её незаменимым инструментом в современной аналитической практике.